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Chondrex 膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎(CIA模型)指南

發(fā)布者:北京博蕾德生物 發(fā)布時間:2024-04-22 分享到:

Chondrex膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎(CIA)實驗指南

2023-10-12 16:19   點擊次數(shù):476 關(guān)鍵詞: Chondrex, CIA,膠原,佐劑,關(guān)節(jié)炎
 
膠原誘導(dǎo)的小鼠關(guān)節(jié)炎(CIA)指南
小鼠品系選擇:
DBA/1(DBA)小鼠或C57BL/6(B6)小鼠
1)7-8周齡
2)SPF條件
3)高脂飲食

推薦的佐劑和膠原
貨號 佐劑   貨號 膠原
7002 不完全佐劑IFA(DBA-只在加強免疫用)   20011 雞II 型膠原,凍干(DBA 或B6)
7008 完全佐劑CFA,1mg/ml(DBA)   20012 雞II 型膠原,2mg/ml(DBA 或B6)
7001 完全佐劑CFA,4mg/ml(DBA)   20021 牛II 型膠原,凍干(DBA)
7023 完全佐劑CFA,5mg/ml(DBA)   20022 牛II 型膠原,2mg/ml(DBA)

免疫程序(選擇其中一種)
方案1:單次免疫(DBA小鼠)
0天:尾根部皮下注射膠原和完全佐劑(4mg/ml)配成的乳劑
0-28天:每7天對關(guān)節(jié)炎評分
28-56天:每2-3天關(guān)節(jié)炎評分,關(guān)節(jié)炎發(fā)病率90-100%
56天:實驗結(jié)束
方案2:加強免疫
0天:尾根部皮下注射膠原和完全佐劑(1mg/ml,DBA 小鼠)或(完全佐劑(5mg/ml,B6小鼠)配成的乳劑
0-28天:每7天對關(guān)節(jié)炎評分
21天:尾根部皮下注射膠原和不完全佐劑(DBA 小鼠)或完全佐劑(5mg/ml,B6小鼠)配成的乳劑。
28-56天:每2-3天關(guān)節(jié)炎評分,關(guān)節(jié)炎發(fā)病率90-100%(DBA), 50-70% (B6)
56天:實驗結(jié)束
用分散機乳劑制備,(不要用2個注射器推送制備)
  1. 準(zhǔn)備好實驗儀器(圖1. 刀頭, b.10ml管(3通栓塞),1ml注射器)
  2. 鎖上活塞
  3. 置于冰上
  4. 加入完全佐劑
  5. 逐滴加入等體積的膠原溶液
  6. 10000-30000rpm 混勻2min?;靹蜻^程中,上下移動針筒。
  7. 置于冰上5min。
  8. 10000-30000rpm 混勻2min。混勻過程中,上下移動針筒。
  9. 滴入水中檢測乳劑混勻質(zhì)量。
  10. 注射器吸取乳劑
乳劑檢測

注射:


a用注射器吸取乳劑(不要有氣泡) b針頭(25 or 27 gauge x 5/8)         c.固定小鼠裝置

皮下免疫乳劑:

免疫后:






注意:一定不要腹腔或靜脈免疫小鼠
 

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