一、關(guān)于小鼠、大鼠品系的選擇:

1、膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（CIA）易感品系選擇：

1）小鼠的常用易感品系：DBA/1、B10.RIII等，而市場上常用的Balb/c和C57BL/6

不敏感，不推薦用于CIA造模。

注：也有客戶用：轉(zhuǎn)基因C57BL/6小鼠做CIA，具體操作可咨詢我公司。

2）大鼠的常用易感品系：WistarFurth、LEW (RT11)、SD等

對(duì)于大鼠、小鼠CIA造模我們推薦客戶選擇相應(yīng)的易感品系造模。

2.佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（AIA）易感品系選擇：（AIA只針對(duì)大鼠。）

大鼠的常用易感品系：Wister-Lewis、SD、Wister、BrownNorway(BN)。

二、凍干膠原(cat#20011/20021)的稀釋:

膠原總量為10mg，配置0.05m/L的醋酸，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，用0.05m/L的醋酸稀釋到指定濃度，4℃過夜溶解。比如：您配置2mg/ml的膠原，可用：5ml0.05mol/L的醋酸溶解。

三、免疫程序：

膠原佐劑配成乳劑后一定要檢測乳劑的質(zhì)量，乳化后的膠原滴入水中不擴(kuò)散才能進(jìn)行免疫，如果滴入水中擴(kuò)散說明乳化效果不好，影響造模效果。乳劑現(xiàn)配現(xiàn)用，乳劑保存時(shí)間不超過1小時(shí)。

1.免疫部位：

A.膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（CIA）

尾根部皮內(nèi)注射:針頭沿斜向上與鼠尾方向平行插入，次注射充分擦拭，防止乳液露出

首次免疫：針尖距尾根部12.5px

加強(qiáng)免疫：針尖距尾根部37.5px

B.佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎（AIA）

尾根部皮內(nèi)注射:針頭沿斜向上與鼠尾方向平行插入，次注射充分擦拭，防止乳液露出。

單次免疫：從尾根部50px處插入針頭，直到針尖插入位置距尾根部12.5px

注：AIA模型也有客戶采用足底免疫。常常只在注射的單爪發(fā)生腫脹。

2.推薦免疫程序：

A.小鼠CIA造模：

初次免疫(0天)：100ul乳劑（膠原+完全佐劑）/只 (注：完全佐劑濃度推薦4mg/ml。)

加強(qiáng)免疫（7天）：100ul乳劑（膠原+不完全佐劑）/只

初次免疫后4-4.5周后發(fā)病。6-8周發(fā)病率在80-100%

B.大鼠CIA 造模：

初次免疫(0day)：200 ul乳劑（膠原+不完全佐劑）/只

加強(qiáng)免疫（7day）：100ul乳劑（膠原+不完全佐劑）/只

初次免疫后2-3周后發(fā)病。3周發(fā)病率在80-100%

C．佐劑誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎(AIA)：

單次免疫(尾根部免疫)：100ul完全佐劑（CFA:10mg/ml）/只。

免疫后12-14天發(fā)病，發(fā)病率80-100%

注：造模影響因素很多，關(guān)于CIA、AIA、CAIA 注意事項(xiàng)和詳細(xì)操作流程，可隨時(shí)聯(lián)系我們索要相應(yīng)操作文檔。